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Novus Novus 北京代理
產(chǎn)品時間:2020-03-16
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北京華新康信生物科技有限公司代理Novus品牌。北京華新康信生物科技有限公司是Novus品牌代理商。

NBP1-71648 Novus  大量現(xiàn)貨,歡迎電聯(lián),真誠合作共贏。

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Novus代理 北京華新康信生物科技有限公司

產(chǎn)品列表如下:

產(chǎn)品貨號       產(chǎn)品名稱       品牌

NBP1-71648  Mouse Monoclonal mtTFA Antibody (18G102B2E11)       NOVUS

H00011232-B01P Mouse Polyclonal POLG2 Antibody    NOVUS

NB110-7081H      Mouse anti-Human IgG4 Fc fragment Secondary Antibody (5C7) [HRP] novus

NBP1-78159  Mouse Monoclonal LDL R Antibody (C7)   NOVUS

NB100-56698       Rabbit Polyclonal MyD88 Antibody [IMGENEX: IMG-178]       NOVUS

NBP2-62766  Human HMGB1/HMG-1 ELISA Kit (Colorimetric)     NOVUS

NBP1-47518AF488      Calreticulin Antibody (1G6A7) [Alexa Fluor 488]       novus

北京華新康信生物科技有限公司專注于生命科學(xué)領(lǐng)域,由豐富從業(yè)經(jīng)驗的技術(shù)團隊和管理團隊組建而成,主營生物化學(xué)試劑,儀器,實驗耗材等。

1廣泛的產(chǎn)品輻射領(lǐng)域,試劑,耗材,儀器等。

2產(chǎn)品種類齊全,北京華新康信與國外諸多生命科學(xué)領(lǐng)域*合作眾多,代理品牌Glycan Therapeutics,Intact Genomics,Integral Molecular,Medkoo,Niomech,Terragene,Anshlabs wako,EZbioscience,CMCTAG,Anatrance ,F(xiàn)avorage ,Affinity,Advanced biomatrix,bioplastics,天地人和,TRC,凱杰,義翹,sciencell;價格優(yōu)勢品牌:seracare,Streck,Toxin,Zeptometrix,sigma,F(xiàn)orteBio,CanSyn,Novus,santa,chormsystems,bethyl ,moltox, permagenlabware ,bioflux,Bio-Rad, coriell,   listlabs, ZYMO , ABclonal  , EY laboratories  ,greatcellsolar , agdia , beckman , Bioxcell,,biomax ,usascientific , TRC ,novus ,americanelements,cayman  , Fisher ,thermofisher ,  nanopore,   日立,  三菱株式會社 ,RD, takara等,緊跟生命科學(xué)的發(fā)展,不斷滿足客戶的需求,為各位的科研之路上添磚加瓦!

3 一手貨源,價格優(yōu)勢明顯

4信譽良好,客戶范圍廣,包括清華、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校,百泰藥業(yè),康龍化成,藥明康德等企業(yè)。

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肽封閉-一種確認(rèn)抗體特異性的方法。

背景:抗體與目標(biāo)表位的特異性結(jié)合是產(chǎn)生準(zhǔn)確表達數(shù)據(jù)所必需的。抗體與非靶標(biāo)抗原的結(jié)合(也稱為非特異性結(jié)合)會增加背景信號并使數(shù)據(jù)解釋復(fù)雜化。在蛋白質(zhì)印跡分析中,通常會通過多個條帶輕松識別非特異性結(jié)合。但是,在免疫組織化學(xué),ELISA,流式細(xì)胞儀,ChIP和其他基于抗體的應(yīng)用中,非特異性抗體結(jié)合的鑒定可能更加困難。

什么是封閉肽?封閉肽是由對應(yīng)于抗體表位(抗體識別的抗原的特定片段)的氨基酸序列組成的肽。阻斷肽將與靶抗體特異性結(jié)合,從而防止隨后的抗體與靶表位結(jié)合。

 

封閉肽如何發(fā)揮作用?可以利用抗體對其表位的高親和力來確認(rèn)結(jié)合特異性。用足夠的肽對抗體進行預(yù)溫育會占據(jù)所有抗體結(jié)合位點,從而阻止樣品中后續(xù)靶蛋白的結(jié)合。

運行封閉肽測定后如何知道我的抗體是否特異性?為了確認(rèn)抗體的特異性,比較用對照抗體和封閉抗體染色的樣品之間的信號強度。如果抗體對目標(biāo)表位具有特異性,則與封閉抗體一起孵育的實驗樣品將顯示出比對照抗體(單獨的抗體,未封閉)弱的信號。

在Western blot中我的肽封閉數(shù)據(jù)應(yīng)該是什么樣的?如果抗體與過量的肽一起孵育并且所有結(jié)合位點都被占據(jù)(封閉),則與封閉抗體一起孵育的樣品應(yīng)無信號。

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蛋白質(zhì)印跡法

介紹

蛋白質(zhì)印跡使用抗體來識別細(xì)胞或組織裂解物中的單個蛋白質(zhì)。抗體與高度特異性的氨基酸序列結(jié)合,稱為表位。由于氨基酸序列因蛋白質(zhì)而異,因此蛋白質(zhì)印跡分析可用于鑒定和定量包含數(shù)千種不同蛋白質(zhì)的裂解物中的單個蛋白質(zhì)。先,通過SDS-PAGE凝膠電泳根據(jù)蛋白質(zhì)的大小將蛋白質(zhì)彼此分離。接下來,通過施加電流將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上。然后可以用對目標(biāo)靶蛋白具有特異性的一抗處理該膜。下一個,

裂解液的制備

亞細(xì)胞定位    推薦緩沖液

全細(xì)胞裂解液       NP-40

核    里帕

線粒體    里帕

細(xì)胞質(zhì)    鹽酸

膜結(jié)合蛋白    里帕

吸出PBS,并加入冰冷的裂解緩沖液(每融合10 7個細(xì)胞/ 100mm皿/ 150 cm 2燒瓶加入1 mL )。請參見下表,以根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞位置推薦裂解緩沖液。

用冰冷的PBS在冰上洗滌細(xì)胞培養(yǎng)皿。

吸出PBS,并加入冰冷的裂解緩沖液(每融合10 7個細(xì)胞/ 100mm皿/ 150 cm 2燒瓶加入1 mL )。請參見下表,以根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞位置推薦裂解緩沖液。

使用細(xì)胞刮刀,將粘附的細(xì)胞從培養(yǎng)皿上刮下來,并將細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到微量離心管中。如果需要,可以將細(xì)胞用胰蛋白酶消化并用PBS洗滌,然后再重懸于裂解緩沖液中。

在4°C下攪拌細(xì)胞30分鐘。

在4°C下離心細(xì)胞裂解液混合物。時間和離心力因每種細(xì)胞類型而異,但是一般指導(dǎo)原則是在12,000 rpm下20分鐘。

將上清液(裂解液)轉(zhuǎn)移到冰上的新試管中。

樣品制備

確定每個細(xì)胞裂解液的蛋白質(zhì)濃度。

確定要加載的蛋白質(zhì)量(推薦:10-50μg/泳道),并添加等體積的2X Laemmli緩沖液。

通過將裂解液在樣品緩沖液中于95-100°C下煮沸5分鐘來減少樣品并使樣品變性。僅在抗體數(shù)據(jù)表建議使用非還原或非變性條件時才應(yīng)跳過此步驟。

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