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小白蛋白貓#MCA-3C9的小鼠單克隆抗體
小白蛋白是一種低分子量胞質(zhì)鈣結(jié)合蛋白,含有“ EF手鈣結(jié)合基序,是該亞類(1)中表征的第yi個蛋白質(zhì)。小白蛋白在快速收縮的肌肉,大腦和某些內(nèi)分泌組織中表達(dá)。在腦中,它尤其集中在分子層的Purkinje細(xì)胞和中間神經(jīng)元中,但在許多皮質(zhì)GABA能中間神經(jīng)元中也發(fā)現(xiàn)(1-3)。這些GABA能神經(jīng)元在大多數(shù)情況下僅表達(dá)三種鈣結(jié)合蛋白之一,即小白蛋白,鈣網(wǎng)蛋白或鈣結(jié)合蛋白。結(jié)果,這些中間神經(jīng)元可以根據(jù)它們在這三種蛋白質(zhì)中的含量(4-6)進(jìn)行識別和分類。每種類型的中間神經(jīng)元都具有不同的電生理特性,因此,可以根據(jù)它們在這三種蛋白質(zhì)中的含量來鑒定和分類不同類型的中間神經(jīng)元(7)。因此,針對小白蛋白的抗體是有用的細(xì)胞類型標(biāo)記物,與這種抗體一樣,它們不會與相關(guān)分子鈣網(wǎng)蛋白或鈣結(jié)合蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)。EnCor還生產(chǎn)雞小白蛋白的多克隆抗體CPCA-Pvalb。我們還提供多種針對calbindin(MCA-9和CPCA-Calb)和calretinin(MCA-3G9,MCA-6A9和CPCA-Calret)的小鼠和雞抗體,可以對適當(dāng)?shù)募?xì)胞和組織樣品進(jìn)行兩次和三次標(biāo)記。鼠標(biāo)左移選擇圖像以獲得更大的視野。
大鼠小腦切片的免疫熒光分析,用小鼠mAb染色小白蛋白,MCA-3C9,稀釋度為1:1,000,綠色,并與雞pAb染色鈣結(jié)合蛋白,CPCA-Calb,稀釋度為1:2,000,紅色。藍(lán)色是核DNA的DAPI染色。用4%多聚甲醛對大鼠進(jìn)行心臟心臟灌注后,將大腦固定24小時,切成45μM,并用上述抗體將自由漂浮的切片染色。大多數(shù)浦肯野細(xì)胞強(qiáng)烈表達(dá)小白蛋白和鈣結(jié)合蛋白,因此呈黃色,而籃,星狀和高爾基細(xì)胞僅表達(dá)小白蛋白,因此呈綠色。
使用小鼠mAb對小白蛋白,MCA-3C9,以1:1,000的綠色稀釋度對骨骼肌溶解產(chǎn)物和His標(biāo)記的重組蛋白進(jìn)行Western印跡分析:[1]蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(紅色),[2]小鼠肌肉,[3]全長人小白蛋白,[4]全長人降鈣素和[5]全長人降鈣素。正如預(yù)期的那樣,在肌肉裂解液中檢測到一條12kDa的條帶,在His標(biāo)記的重組小白蛋白蛋白泳道中檢測到一條18kDa的條帶,因?yàn)镠is-tag和其他載體衍生的序列使該分子增加了約6kDa。請注意,盡管MCA-3C9抗體具有相關(guān)的氨基酸序列,但它們與calbindin或calretinin均不交叉反應(yīng)。
名稱: 小鼠單克隆抗體小白蛋白
免疫原 在大腸桿菌中表達(dá)并純化的全長重組人蛋白質(zhì)。
HGNC名稱: PVALB
分子量: 12kDa的
主辦: 鼠
同型: IgG1
物種交叉反應(yīng): 人,大鼠,小鼠,牛,豬,馬
RRID: AB_2572372
格式: 在50%PBS,50%甘油和5mM NaN 3中的 1mg / mL純化抗體
應(yīng)用范圍: WB,IF / ICC,IHC
推薦的稀釋液: WB:1:1,000-1:5,000 ICC / IF或IHC:1:1,000-1:5,000
存儲: 在4°C穩(wěn)定一年,可在-20°C長期保存
小鼠單克隆抗體髓鞘堿性蛋白
Cat#MCA-7G7
髓磷脂堿性蛋白(MBP)是神經(jīng)系統(tǒng)中軸突周圍髓鞘的主要蛋白之一。由于分子量相對較低且豐度較高,因此30年前從純化的蛋白質(zhì)中確定了蛋白質(zhì)序列(1)。該蛋白質(zhì)由中樞和神經(jīng)系統(tǒng)中的少突膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生,因此針對MBP的抗體是該細(xì)胞類型的良好標(biāo)記。在外周神經(jīng)系統(tǒng)中,MBP是由有髓的雪旺氏細(xì)胞表達(dá)的,因此該抗體可用于識別培養(yǎng)物或切片材料中的這些細(xì)胞。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中,通過從單個基因交替轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的四種不同形式的蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)產(chǎn)物在人體內(nèi)的分子量分別為21.5、20.5、18.5和17.2kDa。嚙齒動物的單個基因也產(chǎn)生4種不同的蛋白質(zhì),但是剪接機(jī)理不同,產(chǎn)生4種形式,大小略有不同,分別為21.5、18.5、17和14kDa。一些興趣集中在MBP作為多發(fā)性硬化癥小鼠模型(MS,3)和人類患者(4)中潛在的重要自身抗原上。檢測釋放到血液和腦脊液中的MBP有可能作為MS脫髓鞘和軸突丟失以及其他相關(guān)損害和疾病狀態(tài)的替代生物標(biāo)志物(例如5)。
MCA-7G7抗體是針對從牛腦中進(jìn)行生物化學(xué)純化的MBP制劑制備的。它可用于鑒定神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)物中的少突膠質(zhì)細(xì)胞和雪旺氏細(xì)胞,可視化切片材料中的髓鞘和髓鞘細(xì)胞,并檢測MBP基因產(chǎn)物的蛋白質(zhì)印跡。該抗體對醛固定也相當(dāng)不敏感,因此可用于石蠟切片的免疫組織化學(xué)。MCA-7G7抗體結(jié)合所有四個CNS MBP亞型,因此該抗體的表位位于所有四個基因產(chǎn)物共有的“核心”中。進(jìn)一步作圖將表位定位于肽TPPPSQGKG,即人21.5kDa序列的氨基酸125-133。用重疊的肽產(chǎn)生了數(shù)據(jù),這表明后四個氨基酸SQGKG可能是表位的關(guān)鍵元素。該肽在大鼠,小鼠,牛和許多其他物種中是不變的,因此該抗體將具有廣泛的適用性。相反,我們的替代小鼠單克隆MCA-7D2僅與21.5kDa和18.5kDa大鼠MBP同種型結(jié)合,但與所有牛和人同種型結(jié)合,將表位映射AEGQRPGFGYGGRASDYKSAHKGFKGVDAQGTLSKIFKLG,即人21.5kDa序列的氨基酸145-184??梢詮拇颂幭螺d人和大鼠中四種CNS MBP同種型的序列比對。鼠標(biāo)左移選擇圖像以查看大圖,而“其他信息”選項(xiàng)卡上則選擇更多信息。
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