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ForteBio代理
產(chǎn)品時(shí)間:2021-10-28
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八位字節(jié) K2 系統(tǒng)

Octet® K2 2 通道系統(tǒng)讓您訪問(wèn)精致的生物分子相互作用數(shù)據(jù)。為初創(chuàng)學(xué)術(shù)和生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室定價(jià),小批量用戶在選擇無(wú)標(biāo)記分析系統(tǒng)時(shí)不再受成本和性能之間的權(quán)衡的束縛。Octet K2 系統(tǒng)表征蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)-小分子結(jié)合相互作用,用于早期研究和發(fā)現(xiàn)。該多用途系統(tǒng)還通過(guò)測(cè)量活性蛋白濃度提供定量信息——即使是在細(xì)胞培養(yǎng)上清液和裂解液等復(fù)雜混合物中。

 

 

小分子分析的靈敏度

Octet K2 系統(tǒng)能夠測(cè)量小至 150 Da 的小分子與其較大的結(jié)合伙伴之間的相互作用,以確定準(zhǔn)確的動(dòng)力學(xué)速率。

 

 

靈活的第二通道用作參考或更多樣品

*的 2 通道設(shè)計(jì)具有用于同時(shí)參考或增加容量的專用光譜儀。

 

 

蛋白質(zhì)和抗體表征的簡(jiǎn)單設(shè)置

模板驅(qū)動(dòng)的界面允許新用戶快速開(kāi)始蛋白質(zhì)和抗體表征。

 

2 通道入門(mén)級(jí) Octet 系統(tǒng):Octet K2

 

技術(shù)

 

基于光纖生物傳感器的生物層干涉測(cè)量 (BLI)

 

樣品量

 

180–220 µL/

無(wú)損檢測(cè),易于回收

 

數(shù)據(jù)呈現(xiàn)

 

顯示動(dòng)力學(xué)軌跡或濃度結(jié)合率的傳感圖

表位合并和交叉阻斷矩陣和軌跡疊加

制表的動(dòng)力學(xué)或濃度數(shù)據(jù)

 

自動(dòng)化

 

最多可同時(shí)進(jìn)行 2 次檢測(cè)

 

軌道流量

 

靜態(tài)或 400–1500 rpm

 

分析溫度

 

環(huán)境溫度 + 4°C 40°C,以 1°C 為增量

 

結(jié)合率常數(shù) (k a )

 

10 1 10 7 M -1 S -1

 

解離速率常數(shù) (k d )

 

10 -6 10 -1-1

 

親和常數(shù) (K D )

 

1 毫米 – 10 下午

 

基線噪聲 (RMS)

 

<3.5 下午

 

基線漂移

 

< 0.1 納米/小時(shí)

 

定量范圍

 

0.05 μg/mL 2000 μg/mL(人 IgG 和蛋白 A 生物傳感器)

依賴于蛋白質(zhì)和測(cè)定

 

定量精度

 

簡(jiǎn)歷 <10%

 

重量

 

58 磅(26.3 公斤)

 

尺寸(高 x x 深)

 

18.6 英寸(高)x 17 英寸(深)x 20.8 英寸(

寬)47 厘米(高)x 43 厘米(深)x 53 厘米(寬)

樣品類型

 

蛋白質(zhì)、抗體、肽、含血清的培養(yǎng)基(高達(dá) 25%)、含 DMSO 的緩沖液、病毒樣顆粒、未處理的細(xì)胞培養(yǎng)上清液和粗細(xì)胞裂解物

 

樣板

 

標(biāo)準(zhǔn)、96 孔、黑色、平底微孔板

 

分子量檢測(cè)

 

>150

Fortebio 公司的超級(jí)鏈霉親和素(ssa)生物傳感器主要是用于小分子應(yīng)用的生物傳感器。當(dāng)用作參考表面時(shí),ssabiosensors 通常被 biocytin 阻塞(有關(guān)運(yùn)行小分子分子量分析的更多細(xì)節(jié),請(qǐng)參見(jiàn)技術(shù)說(shuō)明16,小分子結(jié)合動(dòng)力學(xué))。然而,這個(gè)參考表面的光學(xué)特性不同于目標(biāo)表面的光學(xué)特性,可能是由于光深度的增加伴隨著目標(biāo)生物傳感器蛋白質(zhì)層的增加。對(duì)于高靈敏度的應(yīng)用,這種差異可能在原始數(shù)據(jù)中引入較小的人為因素,導(dǎo)致在評(píng)估化合物或負(fù)性控制時(shí)的變異性略高。當(dāng)使用這里描述的引用方法時(shí),與標(biāo)準(zhǔn)的引用方法相比,模型系統(tǒng)緩沖控制產(chǎn)生的信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)差要低1-3 pm。這個(gè)結(jié)果非常重要,因?yàn)橄挛?/span>1-3點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)差轉(zhuǎn)化為下午3-9點(diǎn)的檢測(cè)限的差異(其中 llod = 3 x 標(biāo)準(zhǔn)差 + 平均背景信號(hào)) ,這對(duì)于從那些接近背景水平的信號(hào)中區(qū)分真實(shí)信號(hào)非常重要。

選擇一個(gè)蛋白質(zhì)作為參考生物傳感器,最佳的參考蛋白質(zhì)是一個(gè)與目標(biāo)蛋白質(zhì)相同,但不結(jié)合感興趣的分子。有些群體很幸運(yùn),有不活躍的蛋白質(zhì)突變體,這些是創(chuàng)建參考生物傳感器的理想?yún)⒖嫉鞍?。如果有這種蛋白質(zhì),它應(yīng)該與目標(biāo)蛋白質(zhì)進(jìn)行類似的生物素化(見(jiàn)技術(shù)說(shuō)明6,將蛋白質(zhì)進(jìn)行生物素化固定在鏈霉親和素生物傳感器上,以及技術(shù)說(shuō)明12,將極少量的蛋白質(zhì)進(jìn)行生物素化固定在鏈霉親和素生物傳感器上)。為達(dá)到最佳效果,生物素化參考蛋白應(yīng)以類似于目標(biāo)蛋白的密度裝載到 ssa 生物傳感器上。生物素化參考蛋白可以按照這里描述的方法進(jìn)行檢測(cè)。更常見(jiàn)的是,不活躍的蛋白質(zhì)版本不可用,必須使用替代物。鏈霉親和素的阻斷形式是一個(gè)有用的替代品ーー在作為參考的 ssa 生物傳感器上增加一層阻斷鏈霉親和素,使目標(biāo)和參考生物傳感器的光學(xué)特性更加相似。為了達(dá)到最佳效果,參考蛋白的負(fù)載信號(hào)應(yīng)該與目標(biāo)蛋白的負(fù)載信號(hào)相似。下面的協(xié)議創(chuàng)建生物素化,阻斷鏈霉親和素(sav-b4) ,并描述了如何使用它在參考生物傳感器。

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