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Octet® AHC2 生物傳感器

96 個涂有抗人 IgG 的生物傳感器托盤，用于對人 IgG 和 IgG 衍生的 Fc 融合蛋白進(jìn)行定量和動力學(xué)分析。5 托盤包裝包括每托盤 10% 的折扣；20 盤盒包括每盤 20% 的折扣

用于含有人類 fc 區(qū)蛋白質(zhì)的定量和動力學(xué)角色塑造的 Octet AHC2生物傳感器

關(guān)鍵特征-含有粗制和純化的人類 Fc 區(qū)域蛋白質(zhì)的快速定量和動力學(xué)分析。改進(jìn)生物傳感器表面配體負(fù)載能力，提高動力學(xué)測定靈敏度，增加定量測定的動態(tài)范圍。- 為多種動力學(xué)或定量測量進(jìn)行高效率和成本效益高的生物傳感器再生。

概述 Octet AHC2生物傳感器是下一代抗人 IgG Fc 捕獲生物傳感器，通過啟用人類 IgG 抗體和 IgG 衍生的 Fc 融合蛋白的定量和動力學(xué)角色塑造，提供顯著改善的性能以及增加的通用性。此外，對于動力學(xué)和定量應(yīng)用，Octet AHC2生物傳感器可以高效和低成本地再生10-20次，這使得它們成為廣泛的高通量應(yīng)用的非常有用的解決方案，包括鉛鑒定和優(yōu)化，細(xì)胞系開發(fā)，工藝開發(fā)和 QC。

動力學(xué)測定工作流程 Octet AHC2生物傳感器用新的抗人 Fc 特異性抗體預(yù)固定，其能夠直接從粗糙或純化的基質(zhì)中捕獲人 IgG 和含人 Fc 區(qū)域的蛋白質(zhì)。與上一代 AHC 生物傳感器相比，它們提供了高達(dá)2倍的人 IgG 和含有 Fc 區(qū)域的蛋白質(zhì)的結(jié)合能力，因此使得它們特別適合于高靈敏度的動力學(xué)測定，例如較小蛋白質(zhì)的表征。圖1中概述了一個利用 Octet AHC2生物傳感器來表征分析物與人 IgG 之間相互作用的實例測定工作流程。圖1: 人類 IgG 和分析物之間的相互作用的動力學(xué)角色塑造，使用的是 Octet AHC2生物傳感器。(A)描述典型步驟的動力學(xué)分析工作流程: 1。平衡(基線) ，2。負(fù)載(捕獲) hIgG，3。基線4。聯(lián)合動力學(xué)，5。解離動力學(xué)解離動力學(xué)。(B)八重奏平臺上配體 hIgG 與分析物 Fab 片段，山羊抗 hIgG (H + L)特異性(50kDa)之間相互作用的動力學(xué)分析。結(jié)合和解離痕跡符合1:1結(jié)合模型。動力學(xué)結(jié)果見表1。表1: 使用 Octet AHC2生物傳感器進(jìn)行配體 hIgG 和分析物 Fab 片段，山羊抗 hIgG (H + L)特異性(50kDa)之間相互作用的動力學(xué)結(jié)果，數(shù)據(jù)如圖1B 所示。

定量分析工作流程八聚體 AHC2生物傳感器根據(jù)蛋白質(zhì)的 Fc 區(qū)與生物傳感器表面結(jié)合的速率來確定抗體濃度。更具體地說，定量是通過將結(jié)合速率與標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線的結(jié)合速率進(jìn)行比較來實現(xiàn)的，標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線是由具有已知濃度的相同的含有 Fc 的人蛋白質(zhì)樣品構(gòu)建的。Octet AHC2生物傳感器對所有四種 hIgG 亞類具有高度特異性，并且可以用于定量粗制和純化的 hIgG，濃度范圍為0.1 -2,000 μg/mL，取決于測定條件。確定的 IgG 濃度與使用正交技術(shù)(如 HPLC)產(chǎn)生的結(jié)果相關(guān)性良好。使用 Octet AHC2生物傳感器產(chǎn)生的 hIgG 定量結(jié)果的示例如圖2所示。圖2: 使用 Octet AHC2生物傳感器定量 hIgG。(A)0.5 -2,000 μg/mL 動態(tài)范圍內(nèi)的濃度的 hIgG 劑量反應(yīng)。(B)使用5PL (加權(quán) Y2)擬合模型計算 hIgG 標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線。

通過標(biāo)準(zhǔn)的低 pH 方案，八聚體 AHC2生物傳感器可以在動力學(xué)和定量測定中再生10-20個循環(huán)，最短時間為2分鐘。再生允許生物傳感器的重復(fù)使用，并提供了一個節(jié)省成本的解決方案來產(chǎn)生配體-分析物對的重復(fù)數(shù)據(jù)，或分析大量樣品的順序。具有10個再生周期的定量測定實例如圖3和表2所示。

圖3: 使用10mM 甘氨酸，pH1.7.3應(yīng)用范圍 Octet AHC2生物傳感器為廣泛的應(yīng)用提供了一個靈活的平臺，從分析動力學(xué)(kon，koff 和 KD)或在含有人類 Fc 的蛋白質(zhì)及其分析物之間進(jìn)行表位分選，到在純化的和粗蛋白質(zhì)樣品(例如上清液和血清)中定量含有人類 Fc 的蛋白質(zhì)。

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